Уметак уређаја за брзи тест ХИВ 1/2 вируса хумане имунодефицијенције
Резиме
ХИВ је етиолошки агенс синдрома стечене имунодефицијенције (АИДС).Вирион је окружен липидним омотачем који потиче од мембране ћелије домаћина.Неколико вирусних гликопротеина је на омоту.Сваки вирус садржи две копије геномске РНК позитивног смисла.ХИВ 1 је изолован од пацијената са АИДС-ом и комплексом повезаним са АИДС-ом, као и од здравих људи са високим потенцијалним ризиком од развоја АИДС-а.1 ХИВ 2 је изолован од пацијената са АИДС-ом у западној Африци и од серопозитивних асимптоматских особа.2 И ХИВ 1 и ХИВ 2 изазивају имуни одговор.3 Детекција ХИВ антитела у серуму, плазми или целој крви је најефикаснији и најчешћи начин да се утврди да ли је особа била изложена ХИВ-у и да се крв и крвни производи прегледају на ХИВ.4 Упркос разликама у њихове биолошке карактеристике, серолошке активности и секвенце генома, ХИВ 1 и ХИВ 2 показују снажну антигену унакрсну реактивност.5,6 Већина ХИВ 2 позитивних серума може се идентификовати коришћењем серолошких тестова заснованих на ХИВ 1.
Уређај за брзи тест ХИВ 1/2 вируса хумане имунодефицијенције (пуна крв/серум/плазма) је брзи тест за квалитативно откривање присуства антитела на ХИВ 1 и/или ХИВ 2 у узорку пуне крви, серума или плазме.Тест користи латекс коњугат и вишеструке рекомбинантне ХИВ протеине да би селективно открио антитела на ХИВ 1/2 у пуној крви, серуму или плазми.
Принцип
Уређај за брзи тест ХИВ 1/2 вируса хумане имунодефицијенције (пуна крв/серум/плазма) је квалитативни имунотест заснован на мембрани за детекцију антитела на ХИВ 1/2 у пуној крви, серуму или плазми.Мембрана је претходно обложена рекомбинантним ХИВ антигенима.Током тестирања, узорак целе крви, серума или плазме реагује са честицама обложеним ХИВ антигеном у тест траци.Смеша затим мигрира нагоре на мембрану хроматографски капиларним деловањем и реагује са рекомбинантним ХИВ антигеном на мембрани у региону тест линије.Ако узорак садржи антитела на ХИВ 1 и/или ХИВ 2, у региону тест линије ће се појавити обојена линија која указује на позитиван резултат.Ако узорак не садржи антитела на ХИВ 1 и/или ХИВ 2, обојена линија се неће појавити у региону тест линије која указује на негативан резултат.Да би служила као процедурална контрола, обојена линија ће се увек појавити у региону контролне линије која указује да је додата одговарајућа запремина узорка и да је дошло до изолације мембране.
Складиштење и стабилност
Комплет се може чувати на собној температури или у фрижидеру (2-30°Ц).Тест уређај је стабилан до истека рока трајања одштампаног на запечаћеној кесици.Тест уређај мора остати у запечаћеној кесици до употребе.НЕ ЗАМРЗАВАЈТЕ.Не користите након истека рока трајања.
Превентивне мере
★ Само за професионалну ин витро дијагностичку употребу.Не користити након истека рока трајања.
★ Немојте јести, пити или пушити у области где се рукује узорцима или комплетима.
★ Рукујте свим узорцима као да садрже инфективне агенсе.Придржавајте се утврђених мера предострожности против микробиолошких опасности током тестирања и пратите стандардне процедуре за правилно одлагање узорака.
★ Носите заштитну одећу као што су лабораторијски мантили, рукавице за једнократну употребу и заштита за очи када се узорци тестирају.
★ Влажност и температура могу негативно утицати на резултате.
Сакупљање и припрема узорака
★ Уређај за брзи тест ХИВ 1/2 вируса хумане имунодефицијенције (пуна крв/серум/плазма) може да се уради коришћењем пуне крви (из вене пункције или прстију), серума или плазме.
★ Да бисте прикупили узорке пуне крви из прстију:
Оперите руке пацијента сапуном и топлом водом или их очистите тампоном алкохолом.Пустите да се осуши.
Пробушите кожу стерилном ланцетом.Обришите први знак крви.
Нежно трљајте руку од зглоба до длана до прста да бисте формирали заобљену кап крви преко места убода.
Додајте узорак целе крви Фингерситцк у уређај за тестирање помоћу капиларне цеви или висеће капи.
★ Одвојите серум или плазму од крви што је пре могуће да бисте избегли хемолизу.Користите само чисте, нехемолизоване узорке.
★ Тестирање треба извршити одмах након узимања узорака.Не остављајте узорке на собној температури дуже време.Узорци серума и плазме могу се чувати на 2-8°Ц до 3 дана.За дуготрајно складиштење, узорке треба чувати испод -20°Ц.Цела крв сакупљена венепункцијом треба да се чува на 2-8°Ц ако се тест ради у року од 2 дана од узимања.Немојте замрзавати узорке пуне крви.Цела крв прикупљена штапићем треба одмах да се тестира.
★ Донесите узорке на собну температуру пре тестирања.Замрзнути узорци морају бити потпуно одмрзнути и добро промешани пре тестирања.Узорке не треба више пута замрзнути и одмрзнути.
★ Ако узорци треба да се отпреме, они треба да буду упаковани у складу са савезним прописима који покривају транспорт етиолошких агенаса.
Материјали
Обезбеђени материјали
| Тест уређаји | Капалице за узорке за једнократну употребу |
| Буффер | Цедуља |
Потребни материјали, али нису обезбеђени
| Контејнери за прикупљање узорака | Ланцети (само за пуну крв из прстију) |
| Центрифуга (само за плазму) | Тајмер |
| Хепаринизоване капиларне цеви за једнократну употребу и сијалица за дозирање (само за пуну крв из прста) | |
Упутство за употребу
Оставите уређај за испитивање, узорак, пуфер и/или контроле да се уравнотеже на собној температури (15-30°Ц) пре тестирања.
1. Извадите уређај за тестирање из кесице од фолије и употребите га што је пре могуће.Најбољи резултати ће се добити ако се анализа изврши у року од једног сата.
2. Поставите уређај за тестирање на чисту и равну површину.
Држите капаљку вертикално и пренесите 2 капи узорка (приближно 80 Л) у бунар за узорке (С) уређаја за тестирање, затим додајте 1 кап пуфера (приближно 40 Л) и покрените тајмер.
3. Сачекајте да се појави линија(е) у боји.Резултат треба очитати за 10 минута.Немојте тумачити резултате након 20 минута.
Тумачење резултата
ПОЗИТИВАН РЕЗУЛТАТ: 
| * Обојена трака се појављује у региону контролне траке (Ц), а друга обојена трака се појављује у региону Т траке. |
| НЕГАТИВАН РЕЗУЛТАТ:
| Једна обојена трака појављује се у региону контролне траке (Ц).Ниједна трака се не појављује у области тест траке (Т). |
| НЕВАЖЕЋИ РЕЗУЛТАТ:
| Контролна трака се не појављује.Резултати било ког теста који није дао контролну траку у одређеном времену очитавања морају се одбацити.Прегледајте процедуру и поновите са новим тестом.Ако проблем и даље постоји, одмах престаните да користите комплет и контактирајте свог локалног дистрибутера. |
Белешка
Интензитет боје у региону тест линије (Т) ће варирати у зависности од концентрације ХИВ антитела присутних у узорку.Стога, било која нијанса боје у тест региону (Т) треба да се сматра позитивном.
Контрола квалитета
Интерне процедуралне контроле су укључене у тест.Обојена линија која се појављује у контролном региону (Ц) је интерна позитивна процедурална контрола.То потврђује довољну запремину узорка и исправну процедуру.
Контролни стандарди се не испоручују са овим комплетом;међутим, препоручује се тестирање позитивних и негативних контрола као добра лабораторијска пракса да би се потврдила процедура тестирања и верификовала исправна изведба теста.
Ограничења
1. Уређај за брзи тест ХИВ 1/2 вируса хумане имунодефицијенције (пуна крв/серум/плазма) је само за ин витро дијагностичку употребу.Овај тест треба користити за откривање антитела на ХИВ у пуној крви, серуму или плазми.Овим квалитативним тестом не може се одредити ни квантитативна вредност ни брзина повећања концентрације антитела на ХИВ.
2. Овај тест ће само указати на присуство антитела на ХИВ у узорку и не би требало да се користи као једини критеријум за дијагнозу ХИВ 1 и/или ХИВ 2 инфекције.
3. За потврду, треба извршити даљу анализу узорака, као што је ЕЛИСА и/или Вестерн блот анализа.
4. Као и код свих дијагностичких тестова, сви резултати се морају тумачити заједно са другим клиничким информацијама које су доступне лекару.
5. Ако је резултат теста негативан и клинички симптоми потрају, препоручују се додатни контролни тестови помоћу других клиничких метода.Негативан резултат у било ком тренутку не искључује могућност инфекције ХИВ 1 и/или ХИВ 2.
Очекиване вредности
Уређај за брзи тест ХИВ 1/2 вируса хумане имунодефицијенције (пуна крв/серум/плазма) упоређен је са водећим комерцијалним ХИВ ЕИА тестом.Корелација између ова два система је 99,8%.
Техничке карактеристике
Осетљивост
Уређај за брзи тест ХИВ 1/2 вируса хумане имунодефицијенције (пуна крв/серум/плазма) тестиран је од стране панела са ниским титаром за анти-ХИВ 1, панелом за перформансе анти-ХИВ 2 и панелом за сероконверзију против ХИВ-а 1 (Бостон Биомедица, Инц. .).Такође је упоређен са водећим комерцијалним ЕИА ХИВ тестом на клиничким узорцима.Резултати показују да је уређај за брзи тест вируса хумане имунодефицијенције ХИВ 1/2 (пуна крв/серум/плазма) веома осетљив на антитела на ХИВ 1 и/или ХИВ 2.
Специфичност
Специфичност теста је упоредива са водећим комерцијалним ХИВ ЕИА тестом.Уређај за брзи тест ХИВ 1/2 вируса хумане имунодефицијенције (пуна крв/серум/плазма) је високо специфичан за анти-ХИВ 1 и/или ХИВ 2 у поређењу са водећим комерцијалним ХИВ ЕИА тестом.
| Метод | ЕИА | Тотал Ресултс | ||
| ХИВ 1/2 Уређај за брзо тестирање | Резултати | Позитивно | Негативно | |
| Позитивно | 554 | 4 | 558 | |
| Негативно | 0 | 1159 | 1159 | |
| Тотал Ресултс | 554 | 1163 | 1717. године | |
Релативна осетљивост: 99,9% (99,3%-100,0%)*Релативна специфичност: 99,6% (99,1%-99,9%)*
Релативна тачност: 99,8% (99,4%-99,9%)*
Прецизност
Интра Ассаи
Прецизност унутар серије је одређена коришћењем 15 реплика три узорка: негативног, ниско позитивног и високо позитивног.Негативне, ниске позитивне и високе позитивне вредности су тачно идентификоване 99,5% времена.
Интер-Ассаи
Прецизност између циклуса одређена је помоћу 15 независних тестова на иста три узорка: негативан, ниско позитиван и високо позитиван.Три различите серије уређаја за брзи тест ХИВ 1/2 вируса хумане имунодефицијенције (пуна крв/серум/плазма) су тестиране коришћењем негативних, ниско позитивних и високо позитивних узорака.Узорци су тачно идентификовани у 99,5% времена.
Библиографија
1.Цханг, СИ, Бовман, БХ, Веисс, ЈБ, Гарциа, РЕ и Вхите, ТЈ.Порекло ХИВ-1 изолата ХТЛВ-ИИИБ.Натуре (1993) 3;363:466-9
2. Ариа, СК, Беавер, Б, Јагодзински, Л, Енсоли, Б, Канки, ПЈ, Алберт, Ј, Фенио, ЕМ, Биберфелд, Г, Загури, ЈФ и Лауре, Ф. Нови ретровируси повезани са ХИВ-ом код људи и мајмуна поседују функционални трансактиватор (тат) ген.Натуре (1987) 328:548-550
3.Цаетано ЈА Имунолошки аспекти ХИВ инфекције.Ацта Мед Порт (1991) 4 Суппл 1:52С-58С
4.Јанссен, РС, Саттен, ГА, Страмер, СЛ, Равал, БД, О'Бриен, ТР, Веиблен, БЈ, Хецхт, ФМ, Јацк, Н, Цлегхорн, ФР, Кахн, ЈО, Цхеснеи, МА и Бусцх МП .Нова стратегија тестирања за откривање ране ХИВ-1 инфекције за употребу у проценама инциденције и у клиничке и превентивне сврхе.ЈАМА (1998) 280(1):42-48
5. Траверс, К, Мбоуп, С, Марлинк, Р, Гуеие-Нидаие, А, Сиби, Т, Тхиор, И, Траоре, И, Диенг-Сарр, А, Санкале, ЈЛ и Муллинс, Ц. Природна заштита од ХИВ-а -1 инфекција коју обезбеђује ХИВ-2.Наука (1995) 268:1612-1615
6.Греенберг, АЕ, Виктор, СЗ, ДеЦоцк, КМ, Смитх, П, Јаффе ХВ и Дондеро, ТЈ, Јр. ХИВ-2 и природна заштита од ХИВ-1 инфекције.Наука (1996) 272: 1959-1960
