Уметак пакета уређаја за брзо тестирање ХЦВ
Увод
Вирус хепатитиса Ц (ХЦВ) је мали, са омотачем, једноланчани РНК вирус позитивног смисла.
Сада је познато да је ХЦВ главни узрок парентерално преносивог не-А, не-Б хепатитиса.Антитело на ХЦВ се налази код преко 80% пацијената са добро документованим хепатитисом не-А, не-Б.Конвенционалне методе не успевају да изолују вирус у ћелијској култури или га визуелизују електронским микроскопом.Клонирање вирусног генома је омогућило развој серолошких тестова који користе рекомбинантне антигене.У поређењу са првом генерацијом ХЦВ ЕИА који користе један рекомбинантни антиген, више антигена који користе рекомбинантни протеин и/или синтетичке пептиде додато је у нове серолошке тестове како би се избегла неспецифична унакрсна реактивност и повећала осетљивост тестова на ХЦВ антитела.
Принцип
Уређај за брзи тест ХЦВ (серум/плазма) је дизајниран да детектује антитела на ХЦВ визуелном интерпретацијом развоја боје у унутрашњој траци.Мембрана је имобилисана протеином А на тест региону.Током теста, узорак је остављен да реагује са колоидним златним коњугатима обојених рекомбинантних ХЦВ антигена, који су претходно премазани на плочици за узорак теста.Смеша се затим креће по мембрани капиларним деловањем и ступа у интеракцију са реагенсима на мембрани.Ако је у узорцима било довољно ХЦВ антитела, обојена трака ће се појавити на тестном делу мембране.Присуство ове обојене траке указује на позитиван резултат, док њено одсуство указује на негативан резултат.Појава обојене траке у контролном региону служи као процедурална контрола.Ово указује да је додата одговарајућа запремина узорка и да је дошло до изолације мембране.
Компоненте комплета
| Појединачно упаковани уређаји за тестирање | Сваки уређај садржи траку са обојеним коњугатима и реактивним реагенсима унапред распоређеним у одговарајућим регионима |
| Пипете за једнократну употребу | За додавање примерака користите |
| Буффер | Слани раствор са фосфатним пуфером и конзерванс |
| Цедуља | За упутства за рад |
Потребни материјали, али нису обезбеђени
| Контејнер за сакупљање узорака | За сакупљање узорака |
| Тајмер | За коришћење времена |
| Центрифуга | За припрему чистих узорака |
Превентивне мере
★ Само за професионалну ин витро дијагностичку употребу.
★ Не користите након истека рока трајања наведеног на паковању.Немојте користити тест ако му је кесица од фолије оштећена.Немојте поново користити тестове.
★ Овај комплет садржи производе животињског порекла.Потврђено познавање порекла и/или санитарног стања животиња не гарантује у потпуности одсуство преносивих патогених агенаса.Због тога се препоручује да се ови производи третирају као потенцијално заразни и да се њима рукује поштујући уобичајене мере предострожности (не гутати или удисати).
★ Избегните унакрсну контаминацију узорака коришћењем новог контејнера за сакупљање узорака за сваки добијени узорак.
★ Пажљиво прочитајте целу процедуру пре извођења било каквих тестова.
★ Немојте јести, пити или пушити у области где се рукује узорцима и комплетима.Рукујте свим узорцима као да садрже инфективне агенсе.Придржавајте се утврђених мера предострожности против микробиолошких опасности током целе процедуре и следите стандардне процедуре за правилно одлагање узорака.Носите заштитну одећу као што су лабораторијски мантили, рукавице за једнократну употребу и заштита за очи када се узорци анализирају.
★ Немојте мењати или мешати реагенсе из различитих серија.
★ Влажност и температура могу негативно утицати на резултате.
★ Коришћене материјале за тестирање треба одбацити у складу са локалним, државним и/или савезним прописима.
Складиштење и стабилност
✽ Комплет треба чувати на 2-30°Ц до истека рока трајања одштампаног на запечаћеној кесици.
✽ Тест мора остати у запечаћеној кесици до употребе.
✽ Не замрзавајте.
✽ Треба водити рачуна о заштити компоненти у овом комплету од контаминације.Не користити ако постоје докази о микробној контаминацији или преципитацији.Биолошка контаминација опреме за дозирање, контејнера или реагенса може довести до лажних резултата.
Сакупљање и складиштење узорака
✔ Уређај за брзи тест ХЦВ (серум/плазма) је намењен само за употребу са узорцима хуманог серума или плазме.
✔ Само бистри, нехемолизовани узорци се препоручују за употребу са овим тестом.Серум или плазму треба одвојити што је пре могуће да се избегне хемолиза.
✔ Извршите тестирање одмах након узимања узорака.Не остављајте узорке на собној температури дуже време.Узорци се могу чувати на 2-8°Ц до 3 дана.За дуготрајно складиштење, узорке треба чувати испод -20°Ц.
✔ Доведите узорке на собну температуру пре тестирања.Замрзнути узорци морају бити потпуно одмрзнути и добро промешани пре тестирања.Избегавајте поновно замрзавање и одмрзавање узорака.
✔ Пакујте узорке у складу са важећим прописима за транспорт етиолошких агенаса, у случају да их треба отпремити.
✔ Иктерични, липемични, хемолизовани, термички обрађени и контаминирани серуми могу изазвати погрешне резултате.
Процедура
Доведите тестове, узорке, пуфер и/или контроле на собну температуру (15-30°Ц) пре употребе.
1. Извадите тест из запечаћене кесице и ставите га на чисту, равну површину.Означите уређај идентификацијом пацијента или контроле.Да би се добио најбољи резултат, тест треба да се уради у року од једног сата.
2. Пренесите 2 капи (приближно 50 Л) серума/плазме и 1 кап пуфера у бунар за узорке уређаја помоћу пипете за једнократну употребу у комплету, а затим покрените тајмер.
Избегавајте хватање ваздушних мехурића у отвор за узорак (С) и немојте испуштати никакав раствор у прозор за посматрање.
Како тест почне да ради, видећете да се боја креће преко мембране.
3. Сачекајте да се појаве траке у боји.Резултат треба очитати за 10 минута.Немојте тумачити резултат након 20 минута.
Тумачење резултата
ПОЗИТИВАН РЕЗУЛТАТ: 
| * Обојена трака се појављује у региону контролне траке (Ц), а друга обојена трака се појављује у региону Т траке |
| НЕГАТИВАН РЕЗУЛТАТ:
| Једна обојена трака појављује се у региону контролне траке (Ц).Ниједна трака се не појављује у области тест траке (Т). |
| НЕВАЖЕЋИ РЕЗУЛТАТ:
| Контролна трака се не појављује.Резултати било ког теста који није дао контролну траку у одређеном времену очитавања морају се одбацити.Прегледајте процедуру и поновите са новим тестом.Ако проблем и даље постоји, одмах престаните да користите комплет и контактирајте свог локалног дистрибутера |
Белешка
1. Интензитет боје у испитном региону (Т) може да варира у зависности од концентрације циљаних супстанци присутних у узорку.Према томе, било која нијанса боје у региону тестирања треба да се сматра позитивном.Осим тога, ниво супстанци се не може одредити овим квалитативним тестом.
2. Недовољна запремина узорка, нетачна процедура рада или извођење тестова са истеклим роком трајања су највероватнији разлози за отказ контролне траке.
Контрола квалитета
★ Интерне процедуралне контроле су укључене у тест.Обојена трака која се појављује у контролном региону (Ц) сматра се интерном позитивном процедуралном контролом.То потврђује довољну запремину узорка и исправну процедуру.
★ Спољне контроле се не испоручују са овим комплетом.Препоручује се да се позитивна и негативна контрола тестирају као добра лабораторијска пракса да се потврди процедура тестирања и да се верификује исправан учинак теста.
Ограничења теста
1. ХЦВ уређај за брзи тест (серум/плазма) је за професионалну ин витро дијагностичку употребу и треба га користити само за квалитативну детекцију антитела на ХЦВ.
2. Уређај за брзи тест на ХЦВ (серум/плазма) ће само указати на присуство ХЦВ антитела у узорку и не би требало да се користи као једини критеријум за дијагнозу ХЦВ вирусне инфекције.
3. Ако је резултат теста негативан и клинички симптоми потрају, препоручује се додатно тестирање коришћењем других клиничких метода.Негативан резултат ни у ком тренутку не искључује постојање антитела на ХЦВ у крви, јер антитела могу бити одсутна или испод минималног нивоа детекције теста.
4. Као и код свих дијагностичких тестова, потврђену дијагнозу треба да постави лекар тек након процене свих клиничких и лабораторијских налаза.
Техничке карактеристике
Табела: ХЦВ брзи тест у односу на ЕИА
| Релативна осетљивост:99,8% (99,0%-100,0%)* Релативна специфичност:99,9% (99,8%-100,0%)* Општи споразум:99,9% (99,7%-99,9%)* *95% интервал поверења | ХЦВ брзи тест | ||||
| + | - | Укупно | |||
| ЕИА | + | 565 | 2 | 567 | |
| - | 1 | 2543 | 2544 | ||
| 566 | 2545 | 3111 | |||
Литература Референце
1.Цхоо, КЛ, Г. Куо, АЈ Веинер, ЛР Оверби, ДВ Брадлеи и М. Хоугхтон.Изолација цДНК клона добијеног из крвљу не-А, не-Б генома вирусног хепатитиса.Сциенце 1989;244:359
2. Куо, Г., КЛ Цхоо, ХЈ Алтер и М. Хоугхтон.Тест за циркулишућа антитела на главни етиолошки вирус хуманог не-А, не-Б хепатитиса.Сциенце 1989;244:362
3.ван дер Поел, ЦЛ, ХТМ Цуиперс, ХВ Реесинк и ПНЛелие.Потврда инфекције вирусом хепатитиса Ц новим рекомбинантним имуноблот тестом са четири антигена.Ланцет 1991;337:317
4.Вилбер, ЈЦ Развој и употреба лабораторијских тестова за инфекцију хепатитисом Ц: преглед.Ј. Цлин.Иммуноассаи 1993;16:204
